Puzzle Neurones 3 de Hippocampal

La distribution des neurones hippocampal exprimant EGFP de l'instigateur Nr4a1/Nur77 (Tg (Nr4a1-EGFP) GY139Gsat, www.gensat.org) en CA1 hippocampal colabelled pour le transporteur vésiculaire de glutamate (VGluT1, rouge, Invitrogen polyclonal, 1:1000) et a souillé avec DAPI (bleu) pour montrer des couches de cellules. L'expression d'EGFP a été amplifiée avec le poulet anti-GFP (Abcam, 1:2000). VGluT1 marque les terminaux excitatoires synapsing dans la couche moléculaire du gyrus dentelé, les terminaux moussus de fibre dans CA3 et les champs dendritiques des cellules pyramidales dans la strate orien et le radiatum de strate. Nr4a1-EGFP est fortement exprimé par les cellules CA1 pyramidales et dans une moindre mesure en cellules CA3 pyramidales avec les cellules clairsemées dans le gyrus dentelé (voir les images associées). La section (40 um, sagittal) a été montée avec Fluoromount G et reflètent avec un 5X, 0,15 objectifs de Na sur un microscope de Zeiss Axiovert. AF568 était excited à 562/40 nanomètre et émission rassemblés à 624/40 nanomètre avec des filtres de Semrock et une bande simple dichroïque (530-585 nanomètre reflété, 601-800 nanomètre transmis). AF488 était excited à 482/35 nanomètre et émission rassemblés à 536/40 nanomètre avec des filtres de Semrock et une bande simple dichroïque (446-499 nanomètre reflété, 513-735 nanomètre transmis). DAPI était excited à 350/50 nanomètre et émission rassemblés à 460/50 nanomètre avec un CLP400 dichroïque (chroma). Des images simples ont été saisies pour chaque canal utilisant M. CCD de Zeiss Axiocam et pseudo-colorées utilisant Axiovision. La soustraction linéaire d'arrière - plan a été employée sur l'image présentée. Voir l'identification 21305052 de Davis et de Puhl (2011), de Pubmed, pour un protocole de souillure détaillé et des images d'expression d'EGFP dans le striatum et l'amygdale dans cette tension. Cette image fait partie d'une série caractérisant l'expression d'EGFP de l'instigateur Nr4a1 dans tout le cerveau.